ВДОСКОНАЛЕННЯ СПОСОБУ ФАРБУВАННЯ МАЗКІВ КРОВІ ДЛЯ ВИЗНАЧЕННЯ ЦИТОМЕТРИЧНИХ ПОКАЗНИКІВ КРОВІ РИБ

Abstract

Кров відіграє роль чутливого індикатора стану здоров’я риб. Як показник ступеню забрудненості водойм можливо використовувати цитометричні показники клітин червоної крові риб. Еритроцити риб чутливі до забруднення навколишнього середовища і їх морфологічні зміни можуть бути використані як біоіндикатор токсичності водного середовища, а ті чи інші патології клітин крові можуть бути викликані певними забруднювачами. Недоліком існуючих способів фарбування мазків крові риб є те, що вони незручні у польових умовах, коли необхідно дослідити кров риб при іхтіологічних дослідженнях або є довготривалими. У зв’язку з цим існує необхідність у швидкому та надійному способі фарбування клітин крові риб, яке може застосовуватися як у лабораторних, так і в польових умовах. Метою роботи було вдосконалити спосіб фарбування мазків крові риб для зручнішого та швидшого виконання, без погіршення якості фарбування. Запропонований спосіб фарбування мазків крові риб випробували на базі лабораторії кафедри загальної біології та водних біоресурсів Дніпровського національного університету імені Олеся Гончара. Об’єктом досліджень була молодь коропових риб (Cyprinidae). Вдосконалений спосіб заснований на класичному способі фарбування за Папенгеймом, але відрізняється інтервалом часу відведеного на фарбування у розчині барвника Романовського. Мазки крові досліджували під мікроскопом Ulab XY-B2TLED (збільшення об’єктиву 40Х) з використанням мікрофотознімання цифровою камерою «Sciencelab T500 5.17 M». Аналіз показав, що еритроцити на препаратах, які перебували у розчині Романовського 5 хвилин, мали правильну форму з чіткими контурами, темно-фіолетове ядро, розташоване в центрі клітини. Було виявлено, що даний спосіб може бути застосований при цитометричних дослідженнях для визначення таких показників: великий повздовжній та малий поперечний діаметри еритроцитів, площі еритроцита, площі ядра еритроцита, ядерно-цитоплазматичного співвідношення, відсоток зрілих та незрілих еритроцитів та їх форм. Також його можна використовувати при аналізі на наявність патологій еритроцитів. Встановлено, що скорочення часу (з 20 хвилин до 5 хвилин) перебування препаратів у розчині барвника Романовського не впливає на якість їх забарвлення, а тому є надійним та швидким способом, який може бути успішно застосований при морфологічних та цитометричних дослідженнях крові риб.